Patologji Molekulare


Qëllimet e përdorimit të teknikatave molekulare


Teknikat molekulare përdoren për qëllime të ndryshme në patologji.

Përdoret për të diagnostikuar tumoret ose sëmundjet infektive dhe për të përcaktuar nëntipet e tumorit me teste të përshtatshme pas vlerësimit morfologjik të një patologu kompetent. Morfologjia plotësuese dhe ekzaminimet molekulare janë bërë gradualisht një pjesë integrale e njëri-tjetrit në diagnostikimin, ndjekjen dhe trajtimin e pacientëve onkologjik. Aq sa emrat e disa tumoreve (tumore të trurit dhe sarkoma të ndryshme) u ndryshuan duke krahasuar teknikat molekulare dhe morfologjitë, dhe u krijuan grupe të reja diagnostikuese.
Shtë e mundur të përdoren terapi të synuara me praninë ose mungesën e mutacionit në indet kancerogjene. Zbulimi i pranisë ose mungesës së këtyre mutacioneve bëhet nga testet e aplikuara në patologjinë molekulare. Për shembull; Testet EGFR, ALK, ROS1 në kancerin e mushkërive, KRAS, NRAS, testet BRAF në kancerin e zorrës së trashë / kancerin e zorrëve, testin Her2 në kancerin e gjirit dhe kancerin e stomakut, testin BRAF në kancerin e tiroides dhe kancerin e lëkurës janë ndër testet rutinë të onkologjisë.
Megjithëse ecuria e sëmundjes varet shumë nga arsyet personale, është e nevojshme të dihet rrjedha e mundshme e sëmundjes për menaxhimin e duhur të trajtimit për pacientin. Prandaj, disa teknika molekulare përdorën onkologët udhëzues. Për shembull; Testet MSI (Paqëndrueshmëria Mikrosatelit), të cilat tregojnë mundësinë e kancerit të trashëguar në kancerin e mitrës, tani zbatohen në mënyrë rutinore në ekzaminimin patologjik.

Teknikat e përdorura në Patologjinë Molekulare

Ngjashëm me studimet imunohistokimike të përdorura çdo ditë në praktikën e patologjisë, lejon përcaktimin e strukturave të proteinave që ndodhin me mutacion. Për shkak se është i shpejtë dhe praktik (siç është BRAF në kancerin e tiroides dhe lëkurës, IDH1 në tumoret e trurit), përdoret në zbulimin e disa mutacioneve.
Ato janë teste të kryera duke përdorur ADN dhe ARN të veçanta kundërshtuese (plotësuese) që lidhen me ADN ose ARN në qeliza. Zbulimi i viruseve (EBER në limfoma të ndryshme, HPV në kancerin e qafës së mitrës), zbulimi i fokusit të tumorit (albumina në mëlçi), zbulimi i ndryshimeve kromozomale (humbja 1p19q në tumoret e trurit, bashkimi i BCR-ABL në disa limfoma) dhe zbulimi i rritjes së gjenit përdoret shprehjet (HER2, EGFR në kancerin e gjirit dhe stomakut).
FlSH (hibridizimi fluoreshent in-situ):
Këto janë ekzaminime të hibridizimit in-situ të kryera duke përdorur pajisje të veçanta fluoreshente lumineshente dhe mikroskopi fluoreshente speciale.
CISH (Hibridizimi kromogjen in-situ): Këto janë ekzaminimet që mundësojnë hibridizimin in-situ të kryhet me mikroskopi drite.
Reaksioni zinxhir i polimerazës (Reaksioni zinxhir i Polimerazës) është procesi i riprodhimit të ADN-së ose ARN-ve të marra nga indet në laborator. Nëse ka mutacione në një numër të caktuar të herëve të replikimit, formohet mjaftueshëm ADN ose ARN e re dhe prania e mutacioneve (për shembull, testet KRAS, NRAS, BRAF në kancerin e zorrës së trashë / kancerin e zorrëve) zbulohen.
Mutacionet e vërejtura në tumore janë shumë të ndryshme. Ndërsa disa mutacione janë faktori kryesor në përhapjen e tumorit, disa mbeten vetëm të dëmtuara dhe nuk ndikojnë në sjelljen (biologjinë e tumorit) të tumorit. Këto mutacione "shofer" që ndikojnë në sjelljen e tumorit dhe mutacionet "e pasagjerëve" që nuk ndikojnë në sjellje janë të ndryshme për sa i përket diagnozës, trajtimit dhe mbijetesës. Për këtë arsye, në patologjinë molekulare përdoren analiza specifike për mutacionet e zgjedhura (analiza të mutacionit në pikë) që mund të përcaktojnë drejtpërdrejt sjelljen e tumorit.
Shtë një analizë e bërë duke lexuar bazat në një sekuencë të ADN-së një nga një. Kështu, kuptohet me të cilin ndryshim ndodhi mutacioni dhe diagnoza dhe zgjedhja e trajtimit bëhet në përputhje me rrethanat.
Të gjitha mutacionet në një tumor mund të zbulohen nga sekuencimi i gjeneratës së re bazuar në leximin e vatrave të shumta të ADN-së në të njëjtën kohë. Përdoret për të zbuluar mutacione që nuk shihen shpesh në tumorin përkatës, por që kanë ilaçe për trajtim, veçanërisht te pacientët me faza të përparuara dhe të cilët kanë përfunduar trajtimet e tyre të para. Sistemi, i cili ndodhet në një numër të kufizuar qendrash në Turqi, përdoret në laboratorin e akredituar të Gjenetikës Memoriale ISO 15189.
Dëmet që shkaktojnë ndryshime në ADN quhen mutacione. Mutacionet ndodhin pothuajse në çdo ndarje qelizore dhe pothuajse të gjitha riparohen. Këto mutacione grumbullohen sepse qelizat kancerogjene rriten shumë shpejt dhe mekanizmat e tyre riparues nuk mund të bëjnë korrigjime adekuate. Barra e matjes së mutacionit e marrë nga raporti i kësaj akumulimi të mutuar me sasinë totale të ADN-së është përdorur kohët e fundit në zgjedhjen e trajtimit. Sa më shumë mutacione të ketë në një tumor (të tilla si kanceri i lëkurës / melanomat), aq më shumë antigjene të huaja do të prodhohen dhe këto tumore do t'i përgjigjen më mirë trajtimeve imunomoduluese (testet PD1-PDL1 të përdorura në shumë lloje të kancerit, veçanërisht kanceri i mushkërive).