Patologi̇a Moleculara


Scopurile utilizării analizelor moleculare


Tehnicile moleculare sunt utilizate în diferite scopuri în patologie.

Este utilizat de cǎtre un patolog competent pentru diagnosticarea tumorilor sau a bolilor infecțioase și pentru determinarea subtipurilor tumorale cu teste adecvate după evaluarea morfologică. Morfologia complementară și examinările moleculare au devenit o parte integrantă pentru diagnosticare , urmărirea și tratamentul pacienților departamentului de Oncologie . De fapt, numele unor tumori (tumori cerebrale și diferite sarcoame) au fost schimbate prin compararea tehnicilor moleculare și a morfologiilor și au fost create noi grupuri de diagnostic.
Este posibil să se utilizeze terapii inteligente in prezența sau absența mutației în țesuturile canceroase. Prezența sau absența acestor mutații este determinată de testele aplicate în patologia moleculară. De exemplu; Testele EGFR, ALK, ROS1 în cancerul pulmonar, KRAS, NRAS, testele BRAF în cancerul de colon / cancerul intestinal, testul Her2 în cancerul de sân și cancerul de stomac, Testul BRAF în cancerul tiroidian și cancerul de piele se numără printre testele de rutină ale Oncologiei.
Deși evoluția bolii este foarte dependentă de motive personale, este necesar să se cunoască evoluția pentru un tratament adecvat pe care sa il aibe administrat pacientul. Din acest motiv, unele tehnici moleculare au folosit specialiștii în oncologie. De exemplu; Testele MSI (Microsatellite Instability), care arată posibilitatea apariției cancerului ereditar în cancerul uterin, sunt acum aplicate în mod obișnuit în examinarea patologică.

Tehnici utilizate în patologia moleculară

Similar studiilor imunohistochimice utilizate zilnic în practica patologiei, permite detectarea structurilor proteice rezultate din mutație. Este utilizat în detectarea unor mutații (cum ar fi BRAF în cancerele de tiroidă și piele, IDH1 în tumorile cerebrale).
Sunt teste efectuate folosind ADN și ARN-uri opuse (complementare) speciale care se leagă de ADN sau ARN-uri din celule. Detectarea virușilor (EBER în diferite limfoame, HPV în cancerul de col uterin), detectarea focarului tumoral (albumina în ficat), detectarea modificărilor cromozomiale (pierderea 1p19q în tumorile cerebrale, fuziunea BCR-ABL în unele limfoame) și detectarea creșterii genei se utilizează expresii (HER2, EGFR în cancerul de sân și stomac)
FISH (hibridizare fluorescentă in situ):
Acestea sunt studii de hibridizare in situ folosind kituri microscopice fluorescente speciale.
CISH (Chromogen in-situ hybridization): Acestea sunt examinările care permit efectuarea hibridizării in-situ cu microscopul iluminat special .
Reacția în lanț a polimerazei (Reacția în lanț a polimerazelor) este procesul de replicare a ADN-ului sau ARN-ului obținut din țesut în laborator. Într-un anumit număr de timpi de replicare, dacă există o mutație, se formează suficient ADN sau ARN nou și se detectează prezența mutației (de exemplu, testele KRAS, NRAS, BRAF în cancerul de colon / cancerul intestinal).
Mutațiile observate în tumori sunt foarte diverse. În timp ce unele mutații sunt factorul principal în proliferarea tumorii, unele rămân doar deteriorate și nu afectează comportamentul tumorii (biologia tumorii). Aceste mutații „conducǎtor ” care afectează comportamentul tumorii și mutațiile „pasagerului” care nu afectează comportamentul diferă în ceea ce privește diagnosticul, tratamentul și supraviețuirea. Din acest motiv, analizele specifice mutațiilor selectate (analiza mutației punctuale) care pot determina în mod direct comportamentul tumorii sunt utilizate în patologia moleculară.
Este analiza făcută prin citirea bazelor într-o secvență ADN una câte una. Astfel, se înțelege cu ce schimbare s-a produs mutația și diagnosticul și selecția tratamentului se fac în consecință.
Toate mutațiile dintr-o tumoare pot fi detectate cu secvențierea următoarei generații pe baza citirii simultane a mai multor loci de ADN. Este utilizat pentru a detecta mutații care nu sunt frecvent observate în tumoarea relevantă, dar au medicamente pentru tratament, în special la pacienții în stadiu avansat care și-au finalizat primul tratament. Sistemul, care este situat într-un număr limitat de centre din Turcia, este utilizat în laboratorul de Genetică Memorial acreditat ISO 15189.
Daunele care provoacă modificări ale ADN-ului se numesc mutații. Mutațiile apar în aproape fiecare diviziune celulară și aproape toate sunt reparate. Aceste mutații se acumulează deoarece celulele canceroase cresc prea repede și mecanismele de reparare nu pot face corecții adecvate. Sarcina de măsurare a mutației obținută prin raportul acestei acumulări mutante la cantitatea totală de ADN a început recent să fie utilizată în selecția tratamentului. Cu cât există mai multe mutații într-o tumoare (cum ar fi cancerul de piele / melanoamele), cu atât vor fi produse mai multe antigene străine și aceste tumori vor răspunde mai bine la tratamentele imunomodulatoare (testele PD1-PDL1 utilizate în multe tipuri de cancer, în special cancerul pulmonar).